单细胞全基因组扩增试剂盒 PicoPLEX® WGA Kit PGS

 TAKARA/ Clontech Rubicon Genomics（RB3050/R30050）

 Rubicon Genomics成立于2000年，总部位于美国密歇根州，致力于研究和开发基因组（Genomics Amplification）技术，其产品广泛应用于NGS测序文库的构建和单细胞水平的研究。 Rubicon Genomics （RB3050/R30050） PicoPLEX® WGA Kit 单细胞全基因组扩增试剂盒用于PCR和基因芯片文库制备，以检测拷贝数变异和染色体的非整倍性。长期以来，PicoPLEX WGA Kits 一直得到体外受精（IVF）同盟成员中的ling先供应商比如 BlueGnome（Illumina 公司）的信任并用于胚胎植入前遗传学筛查和诊断（PGS/PGD）。

    单细胞DNA扩增生成高重现性文库已不再是梦想。PicoPLEX™ WGA试剂盒经zhuan利技术设计和优化，于单个细胞的单拷贝基因组DNA扩增，整个过程在单管中进行，减少了操作误差，显著缩短了时间，降低了背景值。分离所获达6 pg to 50 pg g量的DNA也可以使用PicoPLEX™ WGA试剂盒构建文库。所获产物用于芯片比较基因组杂交(CGH)分析和PCR反应。受美国zhuan利保护。从单细胞(或<15 pg DNA)获得高重现性的结果等位基因呈现(allele representation)具重现性应用简单，自动化水平高，芯片和PCR结果清晰 。

     Rubicon Genomic正式更名为TAKARA/ Clontech

TAKARA/ Clontech 超过30年的服务生命科学研究领域，并支持各种实验应用的试剂盒和试剂，专注细胞和分子生物学研究。Clontech Laboratories, Inc.(现Takara Bio USA, Inc.)。

TAKARA/ Clontech Rubicon Genomics单细胞全基因组扩增试剂盒订货信息

    TAKARA/ Clontech  R30050   PicoPLEX™ WGA Kit,   50 reactions

    TAKARA/ Clontech  R300644  PicoPLEX™ WGA Kit,   500 reactions

    TAKARA/ Clontech  R300671  SMARTer PicoPLEX Single Cell WGA Kit 24Rxns

    TAKARA/ Clontech  R300672  SMARTer PicoPLEX Single Cell WGA Kit 960Rxns

 TAKARA/ Clontech  R300673  SMARTer PicoPLEX Single Cell WGA Kit 480Rxns

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单细胞全基因组扩增试剂盒 PicoPLEX® WGA Kit特性：

1. 单细胞扩增高重性


      使用 PicoPLEX WGA Kit 扩增流式分选的细胞。每个细胞以相同的速率扩增，并得到一个类似的，可预测的产量。样品含 0 个细胞（无模板对照）显示出非常低的背景。
2. CNV数据高重现性

PicoPLEX WGA Kit 扩增单卵裂球活检标本，Genesis 遗传研究院完成标记和杂交 BlueGnome 的 24sure 芯片。
3. 等位基因表达研究高重现性

       位点特异的q-PCR定量分析独立的单细胞文库(independent single-celllibraries)中的48位点。从左到右三个图显示的是用10 pg DNA分别使用PicoPLEX WGA试剂盒，GenomePLEX?和GenomiPhi所获结果。90%的PicoPLEX产物可经测序序列证实，可重复性高。

【产品应用】

     PicoPLEX® WGA Kit 单细胞全基因组扩增试剂盒的适用范围十分广泛，多种原始材料和微量样品均可通过该试剂盒进行单细胞全基因组扩增，随着国家二胎政策的开放，在胚胎植入前遗传学筛查和诊断（PGS/PGD）应用尤其广泛；

•生物标志物研究（CNVs、SNVs） •体外受精胚胎植入前基因测序           •转基因动物基因分型 •胚胎和干细胞研究 •单精子分型 肿瘤 •体细胞遗传变异分析            •肿瘤进化和发展 

•肿瘤干细胞 •循环肿瘤细胞 细菌 •宏基因组学研究  •微生物基因分型

单细胞全基因组扩增试剂盒 PicoPLEX® WGA Kit问与答：

1. PicoPLEX WGA试剂盒的推荐DNA输入是什么?

1-10人细胞(如囊胚、极体、滋养细胞、羊膜细胞、CTCs、培养细胞

2. PicoPLEX®WGA试剂盒推荐哪些应用程序?

拷贝数变异(CNV)分析:寡核苷酸和BAC aCGH较好

SNP基因分型

PCR检测突变

3.在使用PicoPLEX WGA试剂盒之前，是否有一种不粘接的洗涤缓冲液可以用于单细胞洗涤?

这还没有在Rubicon基因组公司得到证实，但一些客户已经成功地使用了聚乙烯醇;例如0.1%)在PBS中清洗/收集细胞。此外，洗涤/收集缓冲液(PBS)也必须是无Ca和mg的。

4. 流程排序有特殊要求吗?

是的，我们强烈建议不要固定，使用光散射或相位对比来分类或收集样品。成功分选细胞的显微/视觉确认可用于优化分选条件。

5. PicoPLEX WGA试剂盒的样品输入体积是多少?

这个工具包将容纳5μl示例输入音量/反应多(2.5μl移行细胞和缓冲区)。

6. PicoPLEX WGA Kit的产品可以直接带到NGS吗?

不。

7. Rubicon Genomics是否有适合单细胞应用的ngs试剂盒?

是的，PicoPLEX DNA-seq可以用于Illumina NGS平台。

8. Sigma-Aldrich销售的是GenomePlex WGA工具包，它与PicoPLEX WGA的技术相同吗?

不，PicoPLEX使用不同的技术。

9. 对于PicoPLEX WGA产品，预期的基因组位点表示和杂合度损失(LOH)是什么?

为便于参考，请参阅下表中从第三方获得的数据。

SNP基因分型方法单细胞扩增

snp呼叫成功率

pcr 95% > 95% < 10%

Illumina Infinium SNP阵列占95% 50% - 60% 7% - 12%

10. 这种技术的产物是单链的还是双链的?

PicoPLEX WGA的终产物是单链和双链DNA的混合物。

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