细胞介绍 华雅干细胞提供的人脐带间充质干细胞是P1代的冻存细胞,或者P1\P2代复苏细胞,可为用户量身定制。该细胞取自满月自然分娩的胎儿脐带,采用无血清人脐带间充质干细胞培养基纯化培养,冻存细胞每支含量为≥2.2×106个,复苏细胞每T-25含量≥1.5×106。该细胞无支原体、病毒、细菌等外源性微生物污染;内毒素指标符合行业标准;具有良好的增殖和分化能力,可以培养多代并维持未分化状态;可附带干细胞表面标记物流式鉴定报告及相应病原微生物检测报告。 货号 HUMSC-01;HUMSC-02A/B;HUMSC-03A/B 规格 按需定制 培养基 无血清培养基或常规培养体系 运输 干冰/特制运输体系 细胞特征 细胞镜下观察:细胞贴壁, 长成梭形,有些细胞排列呈鱼贯状相连,间有旋祸状排列。经过测试具备间充质干细胞的性能特征,具有良好的增殖和分化潜能,可分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞等。 质量控制 严格的细菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体检测,可附第三方检测报告。 培养条件 37℃,5% CO2,PH值7.2~7.4,无菌恒温培养。 用途 本产品仅供科研。 相关操作 细胞复苏 1.把HUMSC培养基放入37℃水浴中预热; 2.从液氮中取出HUMSC迅速放入37℃水浴快速解冻(解冻后不要继续孵育细胞); 3.在超净台中加入5ml的HUMSC培养基重悬细胞,1000rpm离心5min; 4.弃上清,加入5ml的HUMSC培养基重悬细胞,转移到T-25培养瓶; 5.将培养瓶置于37℃,5% CO2的无菌恒温培养箱中培养; 6.第二天,用新鲜的HUMSC培养基给细胞换液。 传代培养 1.在显微镜下观察细胞,当细胞融合度至80%时,即可传代; 2.37℃水浴预热培养基; 3.在超净台中,弃掉T-25细胞培养瓶中的培养基,加入2ml PBS清洗,再加入1ml 0.25%胰酶-EDTA消化细胞; 4.在显微镜下观察到细胞变圆,有细胞开始脱离瓶壁时,即可加入5ml培养基终止消化; 5.用移液器轻轻吹打瓶壁上剩余的细胞,并轻轻吹打将细胞吹散; 6.将细胞转移到15ml离心管中,1200rpm离心4min; 7.弃上清,加入15-20ml的培养基重悬细胞后转入T-75细胞培养瓶中或按适当比例传到 T-25细胞培养瓶中。确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间,细胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25 瓶),混合细胞悬液,确保细胞均匀分布; 8.将细胞培养瓶置于37℃,5% CO2的无菌恒温培养箱中培养; 9.每两天用新鲜、预热的培养基进行换液。 细胞冻存 1.细胞消化和计数,用胰酶对待冻存的细胞进行消化,并对细胞进行计数。 2.1200rpm离心4分钟,去掉上清。 3.根据细胞计数的情况,加入适量的冻存液,使细胞密度在1×106/ml左右(或根据自己希望达到的细胞密度)。 4.轻轻地重悬细胞,将重悬的细胞按等份加入到灭菌的冻存管(需提前做好标记或者贴上标签)中,旋紧冻存管盖。 5.将冻存管放入程序降温冻存盒中,然后将冻存盒直接放入-80℃。 6.第二天将细胞从-80℃转移到液氮中。 提示:细胞培养方案及涉及到的所有试剂耗材,可统一匹配,具体详情,可在线咨询。 相关产品: 血清 血清替代品 基础培养基 无血清培养基 细胞因子 流式抗体 培养瓶 移液管 ... ... 重庆市华雅干细胞技术有限公司在仓库备有现货,欢迎新老客户: |