高通量测序文库DNA/RNA纯化及片段筛选磁珠产品特征 专为DNA和RNA纯化而设计 适用于NGS的核酸片段筛选 有效去除dNTPs,引物,引物二聚体和其他杂质 不需要离心或过滤 重庆市华雅干细胞技术有限公司 , : 名词解释: NGS:高通量测序(High-Throughput Sequencing)又名下一代测序(Next Generation Sequencing,NGS),是相对于传统的桑格测序(Sanger Sequencing)而言的。 CleanNGS核酸纯化磁珠与AMPureXP操作规程和结果无明显差异,但价格更低。 CleanNGS磁珠可以通过调节磁珠和核酸样本体积比,轻松进行核酸片段筛选。 CleanNGS核酸纯化磁珠优势: 1. 优异的缓冲体系,100bp以上扩增产物回收效率更高; 2. 有效去除dNTP、引物、引物二聚体、盐离子和其他杂质; 3. 可进行核酸大小筛选。 3. 磁珠磁含量更高,磁吸附时间更短; 4. 无RNA酶的生产过程确保能应用于各种RNA的纯化操作; 5. 可配套自动化设备进行高通量产物纯化。 6. 与AMPureXP操作规程和结果无明显差异,但价格更低。 CleanNGS核酸纯化磁珠试剂盒使用羧化磁珠纯化DNA、RNA,为新一代测序(NGS)流程提供了高效的纯化系统。 CleanNGS试剂盒具有zui大的灵活性,只要调节样品和CleanNGS磁珠的体积比,可以轻松进行核酸左侧,右侧或双侧大小筛选。 CleanNGS使DNA和/或RNA核酸片段根据其大小选择性地结合到磁珠上,同时根据化学性质去除盐,引物,引物二聚体和dNTP。纯化的DNA和RNA使用水或低盐缓冲液洗脱磁珠,并且可以直接用于下游应用等。CleanNGS可以手动使用,也可以适用于您当前的液体处理工作站所用方法(例如Hamilton,Beckman,Agilent,Caliper,Perkin Elmer,Tecan和Eppendorf)。 应用: CleanNGS系统纯化的产物是用水洗脱的,可立即用于下游应用: 新一代测序、PCR 基因组DNA纯化、RNA纯化 片段分析、微阵列、限制性酶纯化、克隆 CleanNGS DNA/RNA纯化磁珠可配套的液体工作站: Beckman FX, Beckman NX ,Hamilton Microlab Star,Hamilton StarLET,Xiril Neon Instruments,Caliper Sciclone,Thermo KingFisher BioSprint (Qiagen) Ambion MagMax 96,Perkin Elmer Janus,Agilent Bravo等。 工作原理: 羧化磁珠 CleanNGS采用羧化磁珠,可以特异性结合核酸,非特异性洗脱。相比硅基磁珠,非特异性结合更少,产量更高,更具有专有性。 试剂盒组份 CleanNGS羧基化磁珠,含于PCR结合缓冲液中 使用自备材料 •乙醇 •CleanNA环形磁铁板 •用于DNA洗脱的TE或试剂级水 高通量测序文库DNA/RNA纯化及片段筛选磁珠 是欧洲CleanNA产品,可1比1替代MPureXP磁珠。 重庆市华雅干细胞技术有限公司 , : 操作流程: PCR产物纯化流程(上图) 1 添加CleanNGS和Mix以将NGS文库片段或PCR产物结合到磁珠上。 2 将磁珠磁化以将样品与杂质分离。吸出含杂质溶液。 3 加入70%乙醇清洗磁珠。磁珠磁化。吸出乙醇。重复步骤。 4 加入水从磁珠上洗脱DNA。磁珠磁化并提取纯化的PCR产物。 核酸片段筛选流程(上图) 1.添加*份CleanNGS到文库中以结合大片段 2.用磁铁将磁珠从溶液中分离出来 3.将含有较小片段的上清液转移到干净的微孔中 4.添加第二份CleanNGS到上清液中以结合目标大小片段 5.用磁铁将磁珠从溶液中分离出来,吸出并丢弃含杂质的上清液 6.用80%乙醇清洗珠子 7.加入水以从珠上洗脱DNA。使用磁铁分离磁珠,并提取纯化和经过大小筛选的DNA核酸片段。 核酸片段筛选举例:0.8x / 0.7x(左/右)片段筛选,样品量50μL •*步: 添加0.7 x 50μL= 35μLCleanNGS 将大片段结合到磁珠上 结合和分离后转移上清液 •第二步: 将(0.8-0.7)x 50μL= 5μL CleanNGS加入上清液 将感兴趣的片段结合到新一组的磁珠上 吸出并弃上清液(含有zui小的片段) 清洗并洗脱经片段筛选的DNA *步: 添加0.7 x 50μL= 35μLCleanNGS 将大片段结合到磁珠上 结合和分离后转移上清液 第二步: 将(0.8-0.7)x 50μL= 5μL CleanNGS加入上清液 将感兴趣的片段结合到新一组的磁珠上 吸出并弃上清液(含有zui小的片段) 清洗并洗脱经大小片段筛选的DNA 订购信息: 品牌 | 货号 | 产品描述 | 规格(反应次数)* | CleanNA | CNGS-0005 | CleanNGS(5 mL) | 277 | CleanNA | CNGS-0050 | CleanNGS(50 mL) | 2,777 | CleanNA | CNGS-0500 | CleanNGS(500 mL) | 27,777 |
*基于10 µl PCR反应量
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