T 细胞分选与 CD3/CD28 活化能一步完成吗？A56996 一步法工艺优势解析

更新时间：2026-10-21 点击次数：10

传统流程“先分选、再活化"步骤多、波动大；A56996 用 CD3/CD28 双靶向 VHH 把两步合一。

在 CAR-T、TCR-T、TIL 等细胞治疗工艺中，T 细胞既需要被富集分选，也需要通过 CD3/CD28 双信号进行活化。传统方案通常分两步：先分选 CD3⁺ T 细胞，再加入活化磁珠。而 Gibco™ CTS™ Detachable Dynabeads™ CD3/CD28（A56996）通过表面偶联抗 CD3 / 抗 CD28 的 VHH 单域抗体，可在一个步骤内同时完成分选与活化。

一、传统“先分选、再活化"的痛点

步骤多：分选、清洗、再加活化磁珠，操作与转移次数增加，污染与细胞损失风险上升。

状态不一致：分选与活化的衔接时间、比例在不同批次间易波动，影响下游转导效率与扩增。

难放大：多步手工操作不利于向自动化、规模化生产转移。

二、一步法是怎么实现的

A56996 采用 4.5 μm 磁性微球，表面同时偶联针对 CD3 与 CD28 的 VHH 单域抗体，磁珠浓度为 4×10⁸ beads/mL。由于 T 细胞共表达 CD3 与 CD28，磁珠可同时实现：

功能	作用机制
分选（富集）	通过 CD3/CD28 靶向结合，磁分离富集目标 T 细胞
活化（信号 1 + 信号 2）	CD3 提供 TCR 信号、CD28 提供共刺激信号，同步启动活化

也就是说，富集目标细胞与给予活化信号在同一操作中完成，无需先分选、再加珠。

三、一步法带来的工艺收益

关键价值：把“分选 + 活化"整合为一步，使激活时间、目标细胞纯度、回收率、活化程度和最终细胞表型更易被工艺控制。
纯度与回收率可控：一步富集减少多次转移造成的细胞损失。
活化程度一致：统一的 bead-to-cell 比例（约 3:1）与同步信号，利于批次间稳定。
表型可设计：配合可主动脱珠（Release Buffer），能在设定节点停止活化信号，影响终末分化状态。

四、适用细胞治疗类型

该一步法适用于 CAR-T、TCR-T、TIL 等以 T 细胞为核心的生产工艺，同时兼容自体与异体 T 细胞治疗流程，既可用于工艺开发，也可用于临床试验及商业化制造。

五、与常规 Dynabeads CD3/CD28 的选型区别

选型建议：若工艺目标是“缩短步骤 + 精确控制活化时间 + 面向 GMP / 商业化放大"，A56996 的一步法 + 主动脱珠组合更具优势。

六、常见问题

一步法会影响转导效率吗？

同步活化可使 T 细胞进入更适于转导的细胞周期状态；具体转导效率受活化时长、去珠时机与病毒 / 编辑体系影响，建议通过小试验证。

是否适用于异体细胞治疗？

是，A56996 同时适用于自体及异体 T 细胞治疗生产流程。

华雅思创细胞治疗技术团队

提供 T 细胞分选 / 活化整体方案、CAR-T / TCR-T 转导前工艺设计及 CTS 全流程产品组合。本文技术信息引用自 Gibco / Thermo Fisher 资料。

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