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华雅干细胞为你解答ELISA样本值低于空白值的问题在ELISA实验中，样本值低于空白值是一个经常性的问题。当样本值较低接近试剂盒的灵敏度就容易发生样本值低于空白值的现象，特别是在血清和血浆样本的检测。究其原因，主要在于两个方面，一方面是误差，另一方面是基质效应。下文逐个分析不同影响因素的原理、和解决方案。一、基质效应分析中，基质指的是样本中被分析物之外的组分，基质常常对分析物的分析过程有显著的干扰，并影响分析结果的准确性，这些影响和干扰被称为基质效应。ELISA试剂盒在开发过程中，标准品不能采用人或动物血清、血浆作为标准曲线...
2015 5-27
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华雅干细胞为你解答细胞培养常见问题1、可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产品极大的影响。来自不同特种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。2、欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为300xg（约1，000rpm），5-10分钟，过高之转速，将造成细胞死亡。3、冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放放37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其...
2015 5-26
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原代细胞复苏的基本操作方法及其常用耗材介绍一、实验准备（1）仪器：净化工作台、离心机、恒温水浴箱、倒置相差显微镜、培养箱、液氮冰箱（2）玻璃器皿：吸管（弯头、直头）、培养瓶、玻璃瓶（250ml、100ml）、废液缸（3）塑料器皿：吸头、枪头、胶塞、移液管（10ml）、15ml离心管、冻存管（1～2ml）（4）其他物品：微量加样枪、红血球计数板、记号笔、医用橡皮膏、移液枪（5）试剂：PBS、小牛血清、培养液、双抗（青霉素、链霉素）、胰蛋白酶（0.08%）二、操作步骤（1）从液氮容器中取出冻存管，直接浸入37℃温水中，并...
2015 5-25
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脐血中分离干细胞-改良HES分离法脐带血干细胞改良HES分离法是将传统的HES分离法进行优化和改进，在后期给予氯化铵将红细胞液的体积缩减与分离。详细的操作步骤如下:1.确保操作时在无菌的环境下进行，因而需要准备超净台对穿刺部位进行消毒；2.然后将6%的HES分别按照脐血血量的1/4加入到采集来的血袋中；3.混合均匀后使用无菌封口胶密封穿刺点，倒置与10℃的低温环境中静置6小时；4.分离好后先将脐血下层的红细胞缓慢的放出，取50ml离心管置于其中，然后将血浆放入另一只50ml离心管中；5.把盛有红细胞的离心管，...
2015 4-22
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HES分离红细胞HES分离红细胞HES是从支链淀粉衍生出来的，是富含淀粉的复合物，其生理和化学特性主要由取代级、平均分子量决定。大量实验表明平均分子量越大对红细胞的凝集作用越强，有效提高血细胞的沉降速度，从而使血细胞与其它细胞分离。故而，使用HES沉淀法是一种的细胞分离方法。间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)是指一群可向成骨细胞、成脂、肪胞、骨髓基质细胞、肝脏细胞、心肌细胞和神经细胞等多种细胞分化的多潜能组织干细胞,是在细胞治疗、基因治疗中有效发挥作用的理想工...
2015 4-22
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浅谈胰酶的配制方法胰酶的配制方法Hanks液是常见的平衡盐溶液(BSS)之一。D-Hanks液则是无钙镁离子的Hanks液。BSS与细胞生长状态下的pH值、渗透压及无菌状态一致，且配方简单，是组织培养基本用液，常用于配制培养基及其他用液，或洗细胞等，细胞在BSS中可生存几个小时。胰蛋白酶(胰酸)溶液是一种常用的细胞消化液，原代培养时用于处理组织块，使细胞分离下来。传代时用胰蛋白酶使培养细胞离开所贴附的培养瓶表面，并分散成单个细胞。胰蛋白酶主要采自牛或猪的胰脏，呈白色粉末状，易潮解，应在低温干燥...
2014 10-29
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胸腺素β4在其他方面的应用胸腺素β4在其他方面的应用胸腺素β-4是一种胚胎在心脏发育过程中表达的蛋白，它能促进心脏细胞的迁移并影响这些细胞的生死存亡。新研究表明这种蛋白能够在实验诱导的心脏病发作后防止细胞的死亡并限制疤痕组织形成的程度。胸腺素β-4已经被用于临床试验，以促进皮肤创伤的*。胸腺素β4（一种涉及正在发育的胚胎中细胞迁移和存活的蛋白）的活性所做的一项研究所表明的那样。胸腺素β4增强组织培养物中胚胎及出生后心肌细胞的存活能力，在小鼠冠状动脉结扎后腹膜内注射该蛋白，能成功刺激心脏修复和激活AKT...
2014 10-28
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羊水细胞培养基的制备方式一、羊水细胞培养基常规培养法1、采样：选择妊娠13-14周妇女，在无菌条件下抽取羊水5ml，立即注入无菌离心管中。2、收集：离心分离细胞，1000rpm10分钟，去上清，留0.5ml，轻打混匀。3、接种：将混匀的羊水细胞种置于50ml或100ml细胞培养瓶内，平均10ml羊水细胞收集的细胞种置一瓶加5-10ml混合培养液。4、培养：酒精灯火先封口，静置培养48小时后观察细胞贴臂及生长情况，5-10天后可见瓶底面有大量羊水细胞生长。5、终止培养：当有大量圆形发亮细胞出现时，加秋...
2014 9-22
