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无血清培养基优缺点详解无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊椎动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等。大多数的无血清培养基含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质和清蛋白,纤维蛋白,胎球蛋白等,这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同的功能,如提供细胞贴壁所需的基质,抗生物反应器剪切力,作为脂质和其他生长分化因子的载体等。无血清培养基优点:1、可避免血清批次间的质量变动,提高细胞培养和实验结果的重复性。2、避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。3、避免...
2015 6-25
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造血干细胞的造血原理造血干细胞是存在于造血组织中的一群原始造血细胞,它不是组织固定细胞,可存在于造血组织及血液中。造血干细胞在人胚胎2周时可出现于卵黄囊,妊娠5个月后,骨髓开始造血,出生后骨髓成为干细胞的主要来源,在造血组织中,所占比例甚少。现代医学中,造血干细胞在骨髓移植和疾病治疗方面有重要作用。捐献造血干细胞对捐献者的身体并无很大伤害。造血干细胞造血干细胞又称专能干细胞。是存在于造血组织中的一群原始造血细胞。也可以说它是一切血细胞(其中大多数是免疫细胞)的原始细胞。由造血干细胞定向分化、增殖...
2015 6-23
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购买ELISA 试剂盒时应该注意什么地方呢ELISA试剂盒在实验室已经相当普及,现在市面上的ELISA试剂盒既有国产也有进口,数量繁多令人目不暇接,怎样才能选出zui适用的产品呢?首先当然得根据我们所要检测的分子进行检测,除此以外也还有一些需要加以考量的因素,下面小编为大家介绍以下几点,仅供参考。1、重复性:科学实验讲求重复性,一般ELISA试剂盒,其板内和板间变异系数应该控制在15%以内。2、特异性:ELISA试剂盒的特异性与试剂盒的关键组分,抗体对有关。若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,建议使用双单抗。3、...
2015 6-12
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造血干细胞培养基配制人造血干细胞作为成体干细胞的重要组成,尤其在胚胎干细胞定向诱导分化为造血干细胞的机理、CD34和CD45等表面标志分子成功筛选、培养条件的优化探索中取得了突破性进展,这为治疗恶性血液疾病、根本缓解血细胞来源紧张等临床应用提供了可能。本文就人类胚胎干细胞向造血干细胞方向分化的研究进展作如下综述,以期为致力于该研究领域工作的科研人员提供一些有益的参考。人体大部分骨头的中央部门有骨腔,骨腔内所含的物质即骨髓.骨髓中有一种能起着造血功能的细胞就叫造血干细胞.人血中的红细胞,血小板,淋...
2015 6-8
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常用的融合蛋白分为哪几类的呢常用的融合蛋白从分子量和用途上来分,一般可分为如下三类:1.小分子量的融合肽:这类标签蛋白只有几个氨基酸,如polyHis,StrepII-tag,FLAG,c-myc-等,主要用于靶蛋白的纯化,也可用于靶蛋白的辅助检测,且由于分子量很小,几乎不干涉靶蛋白的结构,活性和功能,一般纯化后不用去除标签,非常简单方便。目前zui常使用的是polyHis标签蛋白,可使用金属离子亲和层析(IMAC)进行纯化,用梯度浓度咪唑溶液洗脱。当靶蛋白为包涵体时,也可在变性条件下纯化靶蛋白,容易实...
2015 6-5
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华雅干细胞为你解答ELISA样本值低于空白值的问题在ELISA实验中,样本值低于空白值是一个经常性的问题。当样本值较低接近试剂盒的灵敏度就容易发生样本值低于空白值的现象,特别是在血清和血浆样本的检测。究其原因,主要在于两个方面,一方面是误差,另一方面是基质效应。下文逐个分析不同影响因素的原理、和解决方案。一、基质效应分析中,基质指的是样本中被分析物之外的组分,基质常常对分析物的分析过程有显著的干扰,并影响分析结果的准确性,这些影响和干扰被称为基质效应。ELISA试剂盒在开发过程中,标准品不能采用人或动物血清、血浆作为标准曲线...
2015 5-27
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华雅干细胞为你解答细胞培养常见问题1、可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产品极大的影响。来自不同特种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。2、欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡。3、冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放放37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其...
2015 5-26
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原代细胞复苏的基本操作方法及其常用耗材介绍一、实验准备(1)仪器:净化工作台、离心机、恒温水浴箱、倒置相差显微镜、培养箱、液氮冰箱(2)玻璃器皿:吸管(弯头、直头)、培养瓶、玻璃瓶(250ml、100ml)、废液缸(3)塑料器皿:吸头、枪头、胶塞、移液管(10ml)、15ml离心管、冻存管(1~2ml)(4)其他物品:微量加样枪、红血球计数板、记号笔、医用橡皮膏、移液枪(5)试剂:PBS、小牛血清、培养液、双抗(青霉素、链霉素)、胰蛋白酶(0.08%)二、操作步骤(1)从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并...
2015 5-25